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氯霉素（chloramphenicol，CAP）是一種廣譜性抗生素，是某些微生物，如（Streptomyces venezuelae）的次生代謝產(chǎn)物，能有效地抗革蘭氏陽(yáng)性、革蘭氏陰性、里克次氏體、支原體、衣原體等微生物。自1950年以來(lái)，氯霉素因方便適用，價(jià)格便宜，而作為獸藥被廣泛的使用。氯霉素因被發(fā)現(xiàn)對(duì)人體骨髓造血機(jī)能有抑制作用，可引起人的粒細(xì)胞缺乏病，再生障礙性貧血和溶血性貧血，甚至可導(dǎo)致食用者死亡。

目前，檢測(cè)氯霉素的方法大致可分為篩選方法和確證方法。

常用的篩選方法有微生物學(xué)方法、放射免疫法和酶聯(lián)免疫法。微生物法靈敏度低、反應(yīng)選擇性差；放射免疫法存在同位素半衰期短、放射性污染等不足；酶聯(lián)免疫法作為目前檢測(cè)氯霉素的主要方法，又有假陽(yáng)性高、不能確證的缺點(diǎn)。

確證方法中氣質(zhì)聯(lián)用法需要對(duì)氯霉素分子中的兩個(gè)羥基進(jìn)行衍生化以提高其揮發(fā)性，實(shí)驗(yàn)周期長(zhǎng)，步驟繁瑣。LC-MS法具有定性、定量準(zhǔn)確，檢測(cè)限低，無(wú)需衍生化等優(yōu)點(diǎn)。

GB 31658.2-2021 食品安全guo家標(biāo)準(zhǔn) 動(dòng)物性食品中氯霉素殘留量的測(cè)定 液相色譜-質(zhì)譜/質(zhì)譜法

稱取樣品 5.00g于50mL離心管中，加入4%氯化鈉溶液5mL，乙腈5mL，渦旋2min，8000 r/min，離心5min，取上清液，殘?jiān)貜?fù)提取1次，合并上清液。加入正己烷5mL，渦旋振蕩1min，4000r/min，離心5min，棄去上層液，正己烷重復(fù)處理1次。加水飽和的乙酸乙酯溶液5mL ，渦旋60s，4000r/min，離心5min，上層液轉(zhuǎn)移到15mL離心管中，重復(fù)提取1次，合并提取液，45℃氮?dú)獯蹈桑铀?乙腈（95:5）3mL，溶解，備用。

取固相萃取柱Welchrom^? C18E 500mg 3mL，依次用甲醇、水各10mL預(yù)洗；

取備用液過(guò)柱；

加水洗柱2次，每次3mL；

加入4mL甲醇水（50:50）洗脫，過(guò)柱流速為1滴/s；

加水飽和乙酸乙酯溶液4mL，渦旋1min，4000r/min，離心5min，取上層液，重復(fù)處理1次，合并上層液，氮?dú)獯蹈?。流?dòng)相1mL溶解，混勻，過(guò)0.22μm濾膜，上機(jī)。

注：由于填料較厚，導(dǎo)致無(wú)法自然滴落，需要使用真空泵，保持1滴/s流速。

色譜柱：月旭Boltimate^? LP-C18 Core Shell (2.1×150mm，2.7μm)。

流動(dòng)相：甲醇：水=50：50；

柱溫：30℃；

流速：0.3 mL/min；

進(jìn)樣量：5μL。

離子源：ESI；

檢測(cè)方式：MRM；

干燥氣：氮?dú)猓?50℃，流速：1000L/Hr；

碰撞氣：氬氣；

離子噴霧電壓：1.5kV。

譜圖數(shù)據(jù)